Zeitschrift für forensische Toxikologie und Pharmakologie

Eine schnelle Verdünnungs- und Shoot-Flow-Injektions-MRM-Methode zur Quantifizierung von EtG im Urin

Alagandula R und Guo B

Die Quantifizierung von Ethylglucuronid (EtG, ein Metabolit und Biomarker von Ethanol) im Urin ist sowohl für forensische als auch für klinische Anwendungen von großem Interesse. Derzeit kann ein einziger LC-MS/MS-Durchlauf die überwiegende Mehrheit der Drogen und missbrauchten Substanzen quantifizieren, die im umfassenden Urin-Drogentest (UDT)-Panel enthalten sind, aber EtG muss in einem separaten Durchlauf quantifiziert werden, da EtG polar ist, was den Durchsatz aktueller MS-basierter Methoden begrenzt. In dieser Studie haben wir eine einfache und schnelle MRM-Methode entwickelt, um EtG im Urin ohne LC-Trennung zu quantifizieren. Kurz gesagt wird eine Urinprobe, die EtG enthält, zunächst 20-fach verdünnt, gefolgt von einer direkten Durchflussinjektion der verdünnten Probe in die ESI-Quelle. Die Quantifizierung von EtG wurde durch Mehrfachreaktionsüberwachung (MRM) erreicht, die im negativen Modus mit stabil isotopmarkiertem EtG als internem Standard betrieben wurde. Die Methode wurde vollständig validiert und hat einen dynamischen Bereich von 50-2000 ng/ml (R2 > 0,998). Die Variationskoeffizienten und relativen Fehler für Inter- und Intra-Assay-Studien lagen im Bereich von 2,4 bis 4,2 %. Darüber hinaus wurde ein Robustheitstest mit >1200 Injektionen von Urinproben durchgeführt und es wurden keine signifikanten Verschlechterungen der Sensitivität und Spezifität beobachtet. Diese neue Methode hat eine Gesamtlaufzeit von nur 2 Minuten pro Probe und ermöglicht die Analyse von >700 Proben pro Tag mit einem einzigen Massenspektrometer.