Journal of Pharmaceutics & Drug Delivery Research

Fludarabin- (C2-Methylhydroxyphosphoramid)- [Anti-IGF-1R]: Synthese und selektive antineoplastische Zytotoxizität gegen pulmonales Adenokarzinom (A549)

Coyne CP und Lakshmi Narayanan

Fludarabin- (C2-Methylhydroxyphosphoramid)-[Anti-IGF-1R]: Synthese und selektiv „gezielte“ antineoplastische Zytotoxizität gegen pulmonales Adenokarzinom (A549)

Einleitung: Viele, wenn nicht die meisten konventionellen Chemotherapeutika mit niedrigem Molekulargewicht sind hochwirksam gegen viele Formen neoplastischer Erkrankungen. Leider diffundiert der Großteil einer verabreichten Dosis nach intravenöser Verabreichung unbeabsichtigt passiv in normales Gewebe und gesunde Organsysteme. Eine Strategie zur Steigerung der Wirksamkeit und Verringerung dosislimitierter Folgeerscheinungen ist die selektive „gezielte“ Verabreichung konventioneller Chemotherapeutika .

Materialien und Methoden: Das Fludarabin-(C2-Methylhydroxyphosphoramid)-[Anti-IGF-1R] wurde synthetisiert, indem zunächst Fludarabin mit einem Carbodiimid reagiert wurde, um ein Fludarabin-Carbodiimidphosphatester-Zwischenprodukt zu bilden, das anschließend mit Imidazol reagierte, um ein aminreaktives Fludarabin-(C2-Phosphorylimidazolid)-Zwischenprodukt zu erzeugen. Monoklonales Anti-IGF-1R-Immunglobulin wurde mit dem aminreaktiven Fludarabin-(C2-Phosphorylimidazolid)-Zwischenprodukt kombiniert, was zur Synthese des kovalenten Fludarabin-(C2-Methylhydroxyphosphoramid)-[Anti-IGF-1R]-Immunchemotherapeutikums führte . Restliches Fludarabin und nicht umgesetzte Reagenzien wurden durch serielle Mikrofiltration (MWCO 10.000) entfernt und durch HP-TLC im analytischen Maßstab überwacht. Die erhaltene IGF-1R-Bindungsaffinität von Fludarabin-(C2-Methylhydroxyphosphoramid)-[Anti-IGF-1R] wurde durch Zell-ELISA unter Verwendung von Lungenadenokarzinomzellen (A549) nachgewiesen, die IGF-1R und EGFR überexprimieren. Die antineoplastische zytotoxische Potenz von Fludarabin-(C2-Methylhydroxyphosphoramid)-[Anti-IGF-1R] wurde gegen Lungenadenokarzinome (A549) unter Verwendung einer MTT-basierten Vitalitätsfärbemethode bestimmt.

Ergebnisse: Der Fludarabin-Mol-Inkorporationsindex für Fludarabin- (C2-Methylhydroxyphosphoramid)-[anti-IGF-R1] betrug 3,67:1, während nicht-kovalent gebundenes Fludarabin durch analytische HP-TLC nach serieller Mikrofiltration nicht nachgewiesen wurde. Die Größentrennung von Fludarabin-(C2-Methylhydroxyphosphoramid)-[anti-IGF-1R] durch SDS-PAGE mit chemolumineszierender Autoradiographie ergab nur ein einziges 150-kDa-Band. Zell-ELISA von Fludarabin- (C2-Methylhydroxyphosphoramid)-[anti-IGF-1R], der das gesamte an die äußeren Oberflächenmembranen des Lungenadenokarzinoms (A549) gebundene Immunglobulin misst, nahm mit steigendem