Zeitschrift für immunologische Techniken und Infektionskrankheiten

Epitopkartierung eines langen Peptidkandidaten zur Diagnose von Hepatitis C - Bewertung der Antigenität mittels Multiple Antigen Blot Assay (MABA)

Henry B, Adriana G, Marilyan T, Angelita LM, Sandra L, Daniel AL, Nahir M, Pierina DA, Doneyla S und Oscar N

Epitopkartierung eines langen Peptidkandidaten zur Diagnose von Hepatitis C - Bewertung der Antigenität mittels Multiple Antigen Blot Assay (MABA)

Hepatitis C ist aufgrund seiner hohen Prävalenz und Relevanz sowie der hohen Inzidenz von Leberzirrhose und Leberkrebs ein weltweites Problem der öffentlichen Gesundheit. Frühere Studien identifizierten das im Kern des Virus lokalisierte Peptid IMT-286 (40-mer) als möglichen Kandidaten für die Diagnose von Hepatitis C mittels ELISA. Die Synthese langer Peptide kann zusätzlich zu ihren höheren Kosten durch unerwünschte Reaktionen (Zyklen, Deletionen usw.) eingeschränkt sein, die die Synthese behindern. Daher haben wir beschlossen, ihre Größe zu reduzieren, indem wir die potenziellen Epitope dieser Sequenz auswählen, unabhängig davon, ob sie kontinuierlichen oder diskontinuierlichen Primärsequenzen entsprechen. Dazu wurden verschiedene Peptidsequenzen synthetisiert und mit der Pep-Scan-Strategie auf ihre Antigenität (SPOT-Mapping) untersucht. Zwei Peptide des Core-Antigens zeigten die höchste Empfindlichkeit: Das in der zentralen Region gelegene Peptid IMT-1700 (26-mer) wurde von Seren infizierter Patienten im Multiple Antigen Blot Assay (MABA) zu 59,09 % erkannt, während das Peptid IMT-286 (40-mer) eine Erkennung von 70,45 % zeigte. Das alkalische Phosphatase-Konjugat zeigte bei MABA eine bessere Empfindlichkeit als das Peroxidase-Konjugat mit Luminol® als Substrat.