Zeitschrift für Nanomaterialien und molekulare Nanotechnologie

Herstellung eines mit Quantenpunkten 710 nm und Fluoresceinisothiocyanat konjugierten Anti-Elastase-Antikörpers für den Immunoassay von somatischen Milchzellen

Zlatina Becheva und Tzonka Godjevargova

Herstellung eines mit Quantenpunkten 710 nm und Fluoresceinisothiocyanat konjugierten Anti-Elastase-Antikörpers für den Immunoassay von somatischen Milchzellen

Unter Verwendung von Anti-Elastase-Antikörpern wurde eine neuartige immunfluoreszenzmikroskopische Methode zur Zählung neutrophiler und somatischer Zellen entwickelt. Zwei verschiedene Konjugate – ein Konjugat aus Anti-Rinderneutrophilen-Elastase-Antikörper und Fluoresceinisothiocyanat sowie ein Konjugat aus Anti-Rinderneutrophilen-Elastase-Antikörper und Quantum Dots 710 nm – wurden hergestellt. Die Kopplung von Quantum Dots (QDs) und Fluoresceinisothiocyanat (FITC) an Antikörper wurde durch einen Vergleich der Ultraviolettabsorptionsspektren und Fluoreszenzspektren des Konjugats und der Ausgangskomponenten nachgewiesen. Die Aktivitäten der Konjugate wurden unter denselben Bedingungen durch indirekten ELISA gemessen. Es wurde festgestellt, dass die Empfindlichkeit des Immunassays mit QDs-Konjugat höher war als die Empfindlichkeit des Immunassays mit FITC-Konjugat. Die Lagerstabilität des Konjugats aus Anti-Bovine-Neutrophilen-Elastase-Antikörper-QDs710nm und des Konjugats aus Anti-Bovine-Neutrophilen-Elastase-Antikörper-FITC wurde untersucht. Die verbleibende Fluoreszenzintensität der Anti-Elastase-Antikörper-QDs betrug am 30. Tag 95 %, während die Intensität des Anti-Elastase-Antikörper-FITC-Konjugats am selben Tag auf 60 % abnahm. Die erhaltenen Konjugate wurden in einem Praxistest mit somatischen Zellen aus Rindermilch eingesetzt. Die Fluoreszenzbildgebung zeigte, dass das QDs-Konjugat eine bessere Fluoreszenzintensität als das FITC-Konjugat aufweist und sich besser zur Bestimmung somatischer Zellen in Milch eignet.