Zeitschrift für Veterinärwissenschaft und medizinische Diagnose

Loop Mediated Isothermal Amplification System (LAMP): Eine umfassende Übersicht mit besonderem Bezug auf die Veterinärmedizin

Venkatesan G*, Kushwaha A, Kumar A, Poulinlu G, Karki M, Sasikumar P

Die Loop-vermittelte isotherme Amplifikation (LAMP) ist ein einfacher, schneller, kostengünstiger, empfindlicher und spezifischer Nukleinsäureamplifikationstest bei konstanter Temperatur in einem Wasserbad/Wärmeblock unter Verwendung von Bst-DNA-Polymerase. Es besteht Bedarf an einer kostengünstigen, robusten Diagnosetechnik als Alternative zu PCR- und qPCR-Tests. Der LAMP-Test ist 10-100-mal empfindlicher als die PCR. Diese Technik verwendet vier speziell entwickelte Primer, die sechs verschiedene Regionen in der Ziel-DNA erkennen können, sodass die Spezifität extrem hoch ist. Es gibt mehrere Nachweismethoden, die für Amplifikationsreaktionen in geschlossenen Eintopfgefäßen verfügbar sind, um die Kontamination durch Verschleppung beim Öffnen der amplifizierten Röhrchen zu minimieren/kontrollieren. Die LAMP-Technik wird in der klinischen Diagnose von Krankheitserregern, einschließlich Viren, und anderen Anwendungen eingesetzt, nämlich bei der Typisierung von Einzelnukleotidpolymorphismen (SNP), der Überprüfung auf Fleischverfälschung und dem Nachweis von GVO, der Geschlechtsbestimmung, dem Nachweis von Pestiziden, dem Nachweis von Tumoren und der Quantifizierung von Vorlagen-DNA. Als geschlossene LAMP-Methode kann LAMP als Felddiagnosetool in Umgebungen mit geringen Ressourcen verwendet werden, in denen die Diagnosetests möglicherweise nicht praktikabel sind. Dieser Bericht konzentriert sich auf das Prinzip von LAMP, Nachweismethoden, Modifikationen von LAMP, Vorteile gegenüber der routinemäßigen molekularen Diagnostik und seine Anwendungen in der Veterinärmedizin.