Zeitschrift für Veterinärwissenschaft und medizinische Diagnose

Entwicklung und Leistungscharakterisierung des Doppelantigen-Sandwich-ELISA zum Nachweis von Mycoplasma bovis-Antikörpern

Haifeng Luo, Yanan Guo, Peng Sun, Shuqiang Guo, Shenghu He, Ping Zhao, Liangbei Ke und Heping Zhang

Zusammenfassung
Hintergrund: Mycoplasma (M.) bovis ist ein wichtiger Krankheitserreger bei Rindern, der mit dem Auftreten vieler Krankheiten in Verbindung gebracht wird. Derzeit gibt es keinen wirksamen Impfstoff zur Vorbeugung von M. bovis-Infektionen und auch keine
kommerziellen Impfstoffe. Daher ist dieser Nachweisansatz wichtig für die Bekämpfung der Krankheit und die Überwachung der Prävalenz von M. bovis.
Ziel: Entwicklung und Optimierung eines ELISA und Bewertung der analytischen, diagnostischen und epidemiologischen Leistung.
Tiere: Feldserumproben (n=368) von 9 Rinderfarmen in verschiedenen Landkreisen der Provinz Ningxia, China.
Methoden: Verschiedene Prinzipien des Antikörpernachweis-ELISA wurden verglichen und die Parameter des Doppelantigen-Sandwich-ELISA (DAS) mit rekombinantem P48-Antigen wurden optimiert. Alle Serumproben
wurden mit DAS-ELISA und einem Referenzkit getestet. Genauigkeit, Sensitivität und Spezifität wurden anhand der ROC-Kurve bewertet und ein Boxplot wurde für die
Analyse der Prävalenz und der epidemiologischen Leistung verwendet.
Ergebnisse: Die ROC-Kurvenanalyse für DAS ELISA zeigte, dass die Fläche unter der Kurve 0,807 (p<0,001) betrug. Mit einem Cutoff von OD 1,5 betrug die diagnostische Sensitivität 69,16 % (95 % Konfidenzintervall [CI], 59,5 % bis 77,7 %) bei einer diagnostischen Spezifität von 72,8 % (95 % CI, 67,0 % bis 78,1 %). 6 von 9 mit M. bovis infizierten Farmen wurden erkannt und die Relevanzrate betrug 81,43 %, 75,00 %, 65,79 %, 33,33 %, 38,64 % und 72,84 % mit DAS ELISA, höher als 50,00 %, 50,00 %, 28,95 %, 3,33 %, 29,55, 40,74 % mit Referenzkit.

Schlussfolgerungen: Der optimierte DAS-ELISA lieferte eine eindeutig verbesserte serodiagnostische Leistung sowie ausreichende Sensitivität und Spezifität und wird ein verbessertes Instrument zur Überwachung
und Prävention von M. bovis darstellen.

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