Zeitschrift für Veterinärwissenschaft und medizinische Diagnose

Nachweis von Mycoplasma Spp. in Zellkulturen mittels gattungsspezifischem Polymerase-Kettenreaktionsprotokoll

Claudia F. Lobos, María A. Martínez und Carlos O. Navarro

Die Kontamination von Zellkulturen mit Mycoplasma spp. erschwert die grundlegende Untersuchung und die Entwicklung biologischer Produkte. Die Auswirkungen dieser Bakterien auf kultivierte Zellen sind Veränderungen des Stoffwechsels, der immunologischen und biochemischen Eigenschaften, des Wachstums, der Lebensfähigkeit usw. Eine Infektion mit Mycoplasma spp. in Zellkulturen kann möglicherweise
nicht durch visuelle Inspektion oder gewöhnliche Mikroskopie erkannt werden. Daher ist es wichtig, routinemäßige regelmäßige Bewertungen mit einer hochsensiblen und hochspezifischen schnellen Methode durchzuführen. Hinsichtlich der vorhergehenden Aussage basierte dieser Artikel auf der molekularen Diagnose von Mycoplasma spp. durch Erkennung des 16S-rRNA-Gens mittels der herkömmlichen Polymerase-Kettenreaktionstechnik an Zellkulturproben aus verschiedenen Laboren der Universität von Chile und des chilenischen Instituts für öffentliche Gesundheit. Die bei Positiv- und Negativkontrollen erhaltenen Ergebnisse ermöglichten die Validierung dieser Methode an der Fakultät für Veterinärwissenschaften und ihre Anwendung an verdächtigen Proben des Instituts für Biomedizinische Wissenschaften der Universität von Chile. Dieser Befund wurde durch Abgleich der Nukleotidsequenzen mithilfe der Software Clustal Ω und BLAST (beides kostenlose Online-Software) verifiziert, wodurch sich eine 97-prozentige Nukleotididentität in Bezug auf Mycoplasma spp. aus der GeneBank® ergab.