Zeitschrift für Veterinärwissenschaft und medizinische Diagnose

Entwicklung einer Polymerase-Kettenreaktion (PCR)-Technik zum Nachweis spezifischer Ursachen von Tuberkulose (TB) bei Milchrindern und Menschen

Hossain MZ, Rima UK, Islam MS, Habib MA, Chowdhury MGA, Saha PC, Chowdhury EH und Khan Mahna

Entwicklung einer Polymerase-Kettenreaktion (PCR)-Technik zum Nachweis spezifischer Ursachen von Tuberkulose (TB) bei Milchrindern und Menschen

Tuberkulose (TB) bei Rindern und Menschen wird durch M. bovis, M. tuberculosis und M. avium subsp. var Paratuberculosis (M. paratuberculosis) verursacht. Ausgewählte Milchkühe (N=700) und Menschen (N=20) wurden mit Tuberkulintests und Röntgenbildgebung getestet. Aspirationsbiopsien präskapulärer Lymphknoten von Rindern mit positivem Tuberkulintest sowie Urin, Husten, Pleura- und Peritonealflüssigkeit von mutmaßlich infizierten Menschen wurden zusätzlich mit Ziehl-Neelsen-Färbung untersucht. Genomische DNA von Rindern mit positivem Tuberkulintest (N=23) und mutmaßlich infizierten Menschen (N=20) wurde mit Multiplex-Polymerase-Kettenreaktionen (PCR) getestet, die auf 16srRNA (1030bp, 180bp) abzielten. Die Ergebnisse zeigten, dass 23 Rinder und 11 Menschen mit TB infiziert waren. Um die Infektiosität durch M. bovis und M. tuberculosis festzustellen, wurden ausgewählte Proben von Rindern (N=11) und Menschen (N=11) in einer Uniplex-PCR getestet, die auf die Gene MPB83 (600 bp) bzw. H37Rv Rv3479HP (667 bp) abzielte. Die Ergebnisse der PCR zeigten, dass alle Rinder- und sieben menschlichen Proben ein MPB83-genspezifisches 600-bp-Amplikon erzeugten. Zwei Rinder- und sieben menschliche DNA-Proben erzeugten H37Rv Rv3479HP-genspezifische 667-bp-Amplikons. Sieben Rinder waren mit M. bovis und zwei mit M. tuberculosis infiziert. Zwei Rinder waren mit M. bovis und M. paratuberculosis koinfiziert. Vier Menschen waren mit M. bovis und sieben mit M. tuberculosis infiziert. Das MPB83-Gen wird ausnahmslos von M. bovis und M. tuberculosis gemeinsam genutzt. Das PCR-Protokoll, das auf das Fragment des Gens H37Rv Rv3479HP (667 bp) abzielt, ist selektiv für M. tuberculosis. Die Ergebnisse der Sequenzierung zeigten Punktmutationen in den Genen 16srRNA, MPB83 und H37Rv Rv3479HP. Phylogenetische Analysen der ausgewählten Gene von M. bovis und M. tuberculosis zeigten, dass die Organismen zur Linie 1 gehörten. Intradermaler Tuberkulintest und Ausstrichmikroskopie können nicht zwischen der Infektiosität von M. bovis oder M. tuberculosis unterscheiden. Die PCR-Technik, die spezifisch für M. tuberculosis entwickelt wurde, scheint verwendet zu werden, um die Ursachen von TB bei Säugetieren zu erkennen und zukünftige Präventionsstrategien entsprechend zu entwickeln.