Zeitschrift für Veterinärwissenschaft und medizinische Diagnose

Vergleich dreier alternativer Methoden zum Nachweis von Benzimidazolresistenz bei gastrointestinalen Nematoden bei Ziegen

AK Dixit, G Das und Pooja Dixit

Ziel der vorliegenden Untersuchung war es, den Status der Benzimidazolresistenz bei Magen-Darm-Nematoden von Ziegen auf der Amanala-Farm in Jabalpur mithilfe eines In-vivo-Tests zur Reduzierung der Eierzahl im Kot (FECRT), eines In-vitro-Eierschlupftests (EHA) und eines molekularen Tests – allelspezifische PCR (AS-PCR) – zu untersuchen. Der FECRT- und der Eierschlupftest wurden wie von Coles et al. (2006) beschrieben durchgeführt. Die AS-PCR wurde mit geringfügigen Modifikationen gemäß Chandra et al. (2015) durchgeführt. Im FECR-Test reduzierte Fenbendazol die Eierzahl im Kot um 23 % bei einem unteren Konfidenzintervall von ¬-32 %. Haemonchus contortus, Trichostrongylus spp., Oesophagostomum spp., Strongyloides spp. und Bunostomum spp. Larven wurden in den Kotkulturen vor der Behandlung identifiziert, aber die Koprokultur nach der Behandlung ergab H. contortus (92 %) als den wichtigsten Fadenwurm mit Resistenz, gefolgt von Oesophagostomum spp. (8 %). Ein effektiver Dosiswert (ED50) von 0,335 μg/ml Thiabendazol bestätigte die Existenz von Benzimidazol-resistenten Fadenwürmern im Eierschlupftest. Im molekularen Test betrug die Größe des verschachtelten PCR-Amplikons etwa 820 bp und die mit RsaI RFLP verdauten Fragmente zeigten Hauptfragmente von 550 bp, 170 bp und 100 bp. Die Größe des anfälligen allelspezifischen Gens, des resistenten allelspezifischen Gens und des nicht-allelspezifischen Gens betrug 603 bp, 222 bp bzw. 774 bp. Die Ergebnisse der AS-PCR zeigten, dass 62 % der H. contortus-Larven homozygot resistent (rr), 24 % heterozygot (rS) und 14 % homozygot anfällig (SS) waren. Die Prävalenz des Benzimidazol-Resistenzallels (r) war ebenfalls signifikant (p<0,01) höher (74 %) als des anfälligen Allels (S) (26 %). Obwohl die Ergebnisse aller Tests auf das Vorhandensein von Benzimidazol-resistenten Nematoden hinwiesen, enthüllte FECRT die Gattung der resistenten Nematoden, während die AS-PCR auch Genotypen (rr, rS, SS) der H. contortus-Population entdeckte.